第一步,加入trizo1试剂进行裂解。
加入氯仿。
剧烈震荡。
室温静置五分钟。
这五分钟里,江河站在操作台前,盯着试管,一动不动。
前世的记忆从脑海深处翻涌上来。
重症监护室,消毒水味,沈钰瘦弱如纸,眼神痛苦,反过来却在安慰自己:
“江医生……我不疼了……你别哭……”
每当听见这个声音,江河就会反胃,想要干呕。
“滴——”
计时器响起。
江河将离心管放入高冷冻离心机。
设定参数:4摄氏度,12ooog,15分钟。
十五分钟后,离心结束。
液体分了三层。
吸取最上层含有rna的无色水相。
接着是双重氯仿抽提。
加入糖原共沉淀剂,异丙醇沉淀,负2o度静置,再次离心。
最后用75%的乙醇洗涤,风干,加入无酶水溶解。
整套流程耗时将近两个小时。
江河没有喝一口水。
接下来是逆转录。
利用茎环引物,将微量的mirna逆转录成可以被扩增的neta。
将配制好的pcr反应体系加入96孔板中,放入了qpcr仪的反应槽。
压下盖子。
屏幕亮起,开始进入升温循环。
检测过程需要两个小时。
这两个小时,将决定命运的走向。
江河一动不动,静静等着。
前世,在最痛苦的时候,老师曾经向他过一支烟。
“来一根吧,来一根心情可能会好一点。”
当时江河果断地拒绝:“谢了,但沈钰不喜欢烟味,我就不抽了。”
老师愣在原地,最后苦笑了一下,拍了拍江河的肩膀,不再言语。
屏幕上的循环已经进行到了第三十圈。
坐标轴依然空白。
第三十二个循环。
dxs(杜寻声)的那个孔位,底线突然上扬。
第三十三个循环,第三十四个循环。
曲线开始越清晰。
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