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第203章 孙教授 打不过能加入吗(第3页)

“杨主任,你对基础分子实验也这么有研究?”

杨煦故作谦虚:“医学是不分家的嘛,临床和基础本来就是相辅相成的,再说了,你们这套方案,为了补足二次抽提带来的浓度流失,肯定在沉淀前加了东西吧?”

王晓晴再度惊讶,乖巧点头:“确实。”

“5微升,5mgm1的糖原,糖原作为共沉淀剂,不影响下游的pneta在管底形成肉眼可见的沉淀团块,我说的对吧?”

“对的对的。”

王晓晴觉得杨煦有点厉害了,稍有些崇拜。

杨煦心里乐开了花,脸上云淡风轻。

他转过头,看了江河一眼,挑了挑眉毛。

江河默默地剥开一个橘子,把目光偏向窗外,看天。

——想装就装吧,谁让你是我老师呢。

休息时间结束。

实验重新运转。

接下来的环节是沉淀后的无水乙醇洗涤。

王晓晴准备亲自操作移液枪。

杨煦在她旁边轻声提醒,美其名曰指导:

“王教授,样本沉淀物很小,洗涤的时候,枪头最好贴着管壁对侧下去。”

“我知道。”

“吸的时候慢一点,拇指控制好二挡的回弹力度。”

“杨主任,你挡着我光了。”

“哦哦,抱歉,习惯性盯紧细节。”

就在这时,许久未见的孙长明教授来串门了。

“哎哟,都在忙呢?”

他今日看着心情不错,背着手,春风得意的。

目光扫过全场,看见杨煦也在,笑意更深:“老杨也在啊?怎么,今天医院不忙啊?”

杨煦脸上的笑容一下就消失了,道:“来看看项目进度,你来干什么?”

“我?我是来分享学术经验的。”

孙长明悠然道:“你们还在搞rna提取?设备用得还习惯不?”

杨煦冷漠:“挺好的,不劳孙教授费心。”

孙长明嘿嘿一笑:“老杨啊,其实我今天过来是想说,我们研究所那边,消化道肿瘤的rna提取纯化,刚刚取得了重大突破。”

此话一出,实验室里的众人都抬起了头。

孙长明:“大家都知道,消化液和血清里的rna极其容易降解,我们团队花了一个月的时间,反复调整试剂配比,终于摸索出了一套极限纯化的办法。”

王晓晴好奇道:“噢?说来听听。”

孙长明坐直了身体,开始长篇大论:

“最重要的就是放弃传统的trizo1,我们采用了硅胶膜离心柱法结合多重酶解,先,在裂解阶段加入高浓度的蛋白酶k,56度水浴消化一个小时,然后,利用离心柱进行过柱,为了洗掉多糖杂质,我们专门配制了一种含高浓度盐酸胍和异丙醇的洗脱液,反复洗脱三次。”

“虽然这个流程耗时要四个多小时,成本也高,但纯度那是没得说,a26o28o的比值,我们稳定做到了1.75以上!这在当前的液体活检领域,绝对是领先水平!”

说完,孙长明往椅背上一靠,端起桌上的水杯喝了一口,等待着惊叹声。

1.75的纯度,在o8年,确实值得骄傲。

然而,实验室里众人的表情都怪怪的。

大家面面相觑,好像不知道该说什么好。

孙长明皱了皱眉:“怎么?没听懂?也是,这套酶解过柱的体系确实复杂了点,你们刚接触湿实验,慢慢来……”

“不是,孙教授。”陈浩默默地举起了手,“我有个问题。”

“你说。”孙长明点点头。

陈浩语气真诚地问:“既然是要解决蛋白污染和降解的问题,为什么一定要用蛋白酶k去水浴消化一个小时,还要花那么高成本去买离心柱反复洗脱呢?”

孙长明愣了一下:“不用这些,你怎么去蛋白?怎么提纯?”

陈浩理所当然地回答:“双重氯仿抽提,加糖原共沉淀啊,我们老大提出来的这个方法,牺牲点第一次的上清液体积,再加一次氯仿离心,蛋白就全沉下去了,然后补5微升糖原把rna析出来,整个流程下来四十分钟就搞定了,效果很好呀,为什么要搞得像你那么复杂?”

孙长明:“?”

反应了半天后,孙长明抗拒道:“不对,氯仿确实能去蛋白,但你抽提两次,水相里的rna早就流失得七七八八了,就算加了糖原,浓度也绝对达不到下游要求,纯度就更别提了,能过1.5都算你们运气好。”

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