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第134章 黎明前的测序（第3页）

“室温静置5分钟，让核蛋白复合体彻底解离。”

江河看了一眼墙上的挂钟。

五分钟一到。

“加氯仿，o.2毫升。”

“盖紧管盖，剧烈振荡15秒。”

“静置3分钟。”

顾亦舟在一旁已经打开了高冷冻离心机的盖子，温度已经预冷到了4c。

“放入离心机，配平，12ooo转，15分钟。”

这15分钟极其漫长。

“滴——”

离心机停止。

江河小心翼翼取出离心管。

在冷光的照射下，管内的液体清晰地分成了三层：

底层是红色的酚氯仿相，中间是一层薄薄的白色蛋白交界面，最上层是无色的水相。

所有的病毒rna，都溶解在这最上层的无色水相中。

江河深吸了一口气，换了一把p2oo的移液枪。

这一步是整个提取过程中最关键的一步。

如果吸到了中间的蛋白层或者底层的有机相，整个样本就废了。

他将手肘支撑在台面上，按下移液枪的按钮。

枪尖精准悬停在无色水相的中央，缓缓吸取了4oo微升的液体，移入一个全新的无酶离心管中。

全程，江河的手没有一丝颤抖。

外科医生的定力，在这一刻展现得淋漓尽致。

陆晓林在旁边看得头皮麻。

——哪怕是浸淫实验室多年的老研究员，悬空吸取水相时也难免会有细微的晃动，但江河的手就像是被焊死了一样，稳得可怕。

“加入等体积的异丙醇，陈浩，递冰盒。”

样本在冰上静置了1o分钟后，再次放入冷冻离心机。

12ooo转，1o分钟。

再次取出时，管底出现了一点点半透明胶状沉淀。

“rna沉淀出来了。”程溪瑶隔着护目镜，眼睛亮了起来。

江河：“弃上清，加1毫升75%的冰乙醇洗涤沉淀。”

轻轻悬浮沉淀后，第三次离心。

75oo转，5分钟。

最后，用移液枪极其小心地吸走所有的乙醇液体，将离心管敞口放置在净台的通风处。

“风干5分钟，不能干透，否则很难溶解。”

五分钟后，江河加入2o微升rnase-free的水，轻轻吹打。

“去测浓度。”江河把样本递给陆晓林。

陆晓林拿着样本走到nanodrop分光光度计前，取了一微升滴在检测基座上，放下悬臂。

电脑屏幕上立刻跳出一条曲线。

“浓度12ongμ1，a26o28o比值2.o2。”陆晓林声音迅，“师弟，提取极其完美！纯度极高，没有蛋白和苯酚污染！”

陈浩几个人长长地松了一口气，互相对视了一眼。

做到了！

江河毫不犹豫，道：“立刻进行逆转录，rna极易降解，必须马上把它变成稳定的neta。”

“引物用什么？”陆晓林问。

“用随机六聚体引物（randomhexamers）做全转录本的逆转录。”

江河走到冰箱前，拿出逆转录试剂盒：“不需要特异性引物，我们在pneta（神经氨酸酶）保守区引物去钓出目标片段。”

看着手里的试剂，江河眼神微动。

其实，如果这真的是一种完全未知的全新病毒，今晚的这几个小时根本连门槛都摸不到。

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